如何检测狗的抗体步骤?
1、在待测血清中加入一定量的酶素,通过酶素的酶切作用,将待测血清中可能存在的抗血清抗体进行特异性的酶切清除,酶切反应为37度反应1小时。
2、将经过抗血清抗体酶切清除后的待测血清用倍比稀释的方法做样本准备,通常做6个梯度,每个梯度稀释2倍。
3、在预先包被好相应抗原的微孔中,加入一定稀释倍数的血清样本,37度反应1小时,反应过程中血清中相应的抗体与包被抗原结合。
4、洗涤,用洗液将未结合的血清及血清中其他成分洗掉。
5、加入酶标二抗,37度反应30分钟。反应过程中酶标二抗与前面结合上抗原的抗体结合,从而间接的形成了抗原-抗体-酶标抗体的复合物。
6、洗涤,用洗液将未反应的酶标二抗及反应过程中产生的杂质洗掉。
7、加入底物液,37度反应10-15分钟,在此过程中,酶催化底物呈色。
8、在450nm波长下测光密度值。